细胞相关

细胞凋亡

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细胞自噬/凋亡/程序性坏死细胞培养与处理10个工作日细胞株原始数据、结果分析、实验报告
相关试剂处理相关抑制剂及检测试剂盒
Western Blot检测(不提供抗体)目的抗体


细胞凋亡检测

细胞凋亡是细胞主动实施的一种程序性死亡,是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。

检测方法

    WB检测相关蛋白、流式上机检测、Tunuel染色以及荧光拍照/共聚焦拍照

实验原理

AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kDCa2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS高亲和力特异性结合。因此AnnexinV作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将AnnexinⅤ进行荧光素FITC标记,以标记了的AnnexinV作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙锭(PropidiumIodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜使细胞核染红。因此将AnnexinVPI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。


注意事项

1、 AnnexinV是光敏物质,在操作时要注意避光。

2、 荧光显微镜下观察细胞时,由于荧光易碎灭,观察时要尽量快。

3、 整个操作过程动作要尽量轻柔,切勿用力吹打细胞。